建鲤生长性状分子育种研究
1、家系构建情况
2010年构建家系10个,每个家系200尾放在池塘养殖,另外构建了建鲤与荷包红鲤正交家系4个,反交家系5个,每个家系标记90尾,结果第二天死亡17尾,水泥池暂养10天后放入池塘。采集了亲本的DNA,用于筛选区分各家系的微卫星标记。12月3日收获10个家系共663尾鱼,测量了今年繁殖的鱼的体重、体长、体宽等经济性状,并打上PIT标记。分析今年10个家系建鲤成活率低的原因是没有进行规范的发塘,水花进入池塘到夏花阶段死亡率太高导致的。2011年会在发塘过程进行规范,争取有较高的成活率。
2、建鲤生长相关基因的分离
本课题组共分离了建鲤生长轴基因:jlGHs (2个)、jlGHRs (4个)、jlIGF1s(2个)、jlIGF2s(3个);生长激素促泌素基因jlGRLNs (pro-ghrelin) (2个)、生长激素促泌素受体 (jlGHSRs) (4个)、Ghrelin受体jlGPR39s (1个)以及2个ghrelin辛酸酰基转移酶的cDNA转录子 (jlGOAT);另外还有肌肉生长抑素(jlMSTNs) (4个)、jlLeptin 1s(2个)、jlIGFBP3s(2个)。其中jlGHs中的内含子3还存在长和短两种类型;jlGHRs存在多种转录子;jlGHSR1s发现不同于罗非鱼、鲑鳟鱼、鲇鱼等的jlGHSR1s′,还发现了jlGHSR2a′,其内含子的两端碱基不是GT-AG,而是CT-AC;2个ghrelin辛酸酰基转移酶的cDNA转录子的差异在于内含子的不同切割导致的。
3、与增重相关的分子标记
至今比较全面地寻找了jlGHRs、jlGHSR1s、jlIGF1s、jlIGF2as、jlFABP3s和jlMSTNs基因上的SNPs,检测了其中25个SNP位点在12个建鲤家系(共937尾)中的基因型分布,通过关联分析找到8个和6个标记分别与雌、雄建鲤从鱼苗到成鱼的增重极显著或显著相关,数据分析表明随着标记数的增加平均增重呈上升趋势。
4、使用微卫星区分家系
已经在65个微卫星标记中筛选到9个扩增条带清晰、稳定性好及其等位基因在10个家系的亲本间存在差异。最近正继续筛选具有上述特征的微卫星标记,并使用这些标记对10个家系 (每个家系6-8尾)进行初步验证,确定家系鉴别的可靠性。
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