贝加尔雅罗鱼

mtDNA分析

（1）

采集时间：1981-1985年

样品来源：新疆赛里木湖，新疆额尔齐斯河

取样部位：肌肉组织

样本数：10尾巴

实验技术：PCR扩增

目的基因：mtDNA Cytb

引物信息：：L14724：5’ 一G A C T T G A A A A A C C A C C G T T G一 3’

H15149：5 ’一C C T C A GA A G G A T A T T T GT C CTC一3’

扩增条件：

扩增反应总体积为50微升，其中含有50 ng的模板DNA，2.5 U的Taq DNA聚合酶，1×buffer，每种引物浓度分别为0．2 μmol／L，dNTP浓度为100μmol／L，Mg 浓度为1．5 mmol／L。PCR扩增反应在PE PTC一100 热循环仪上进行。反应条件为：95℃ 2 min后进行36个循环的94℃ 30 S、49℃ 30 S、72℃ 1 min。之后，反应于72℃延伸10 min，4℃结束。

扩增片段大小：489bp

图片说明：高体雅罗鱼等三种雅罗鱼mtDNA Cytb扩增结果

参考文献：

胡文革,段子渊,王金富等. 新疆3种雅罗鱼线粒体DNA细胞色素b序列的差异与系统进化 [J]. 动物学杂志, 2005, 40 (3) 6 .

（2）

采集时间：1981-1985年

样品来源： 新疆赛里木湖，新疆额尔齐斯河

取样部位：肌肉

样本数：20尾

实验技术：PCR扩增

目的基因：mtDNA D-loop

引物信息：

P2-U(5’ -TTAACTCCCAC—CCCTGGCT-3’ )

P1-L(5’ –CACGTTCTCGAACCTTCCTT-3’

扩增条件：

扩增反应总体积为50 uL，其中含有50 ng的模板DNA，1．6 U的Taq DNA聚合酶，1 X Bufer，每种引物浓度分别为0.2μmol／L，dNTP浓度为100pmol／L，Mg离子浓度为1.5 pmol／L。PCR扩增反应在PE PTC-100 热循环仪上进行。反应程序为：95℃ 2 min；94℃ 30 S，51℃ 30 S，72℃ 1 min 30 S，进行35个循环；最后再72℃延伸10 min，4℃结束。

扩增片段大小：827bp

参考文献：

胡文革,段子渊,王金富等. 新疆3种雅罗鱼线粒体DNA控制区序列的差异和系统进化关系 [J]. 遗传学报, 2004, 31 (9) 6 .

染色体

采集地点：新疆，伊犁河，三道河口

取样部位：肾

取样数量：3尾

检测单位：哈密师范学校

实验方法：体内注射小牛血清和秋水仙素短期培养，经低渗、固定、低片，干冻玻片制片，吉姆萨染色。

染色体数：2n=50

核型方式：2n=8m+16sm+26t